Laboratorio di Cariologia

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Ente di Afferenza
Università degli Studi di Cagliari
Area / Struttura
Dipartimento di Scienze della Vita e dell'Ambiente
Sede
Ponte Vittorio
Responsabile Laboratorio
Anna Maria Deiana
Descrizione
L'attività di laboratorio riguarda l'analisi citogenetica di diverse specie di pesci ossei (Attinopterigi) e di crostacei decapodi con lo scopo di descrivere e caratterizzare il complemento cromosomico mediante bandeggi cromosomici classici e molecolari. Inoltre la comparazione citogenetica tra specie e popolazioni permette di determinare la presenza di markers utili per la loro identificazione e di ricostruire l'evoluzione del cariotipo con lo scopo di studiare, a livello citogenetico, le relazioni filogenetiche tra specie. L'analisi citogenetica viene effettuata mediante l'utilizzo di diverse metodiche: colture cellulari da sangue (per le specie di pesci) e metodi diretti (per le specie di crostacei) per l'ottenimento delle piastre metafasiche, bandeggi cromosomici in campo chiaro e in fluorescenza per la descrizione e caratterizzazione del cariotipo e delle regioni eucromatiche ed eterocromatiche, ibridazione in situ in fluorescenza (FISH) per la localizzazione cromosomica di specifiche frazioni di DNA, analisi dei risultati e comparazione tra specie mediante l'utilizzo di sistemi di analisi d'immagine dedicati alla cariotipizzazione.
Attività rivolte alle imprese,
enti pubblici, cittadini
Partecipazione a progetti nazionali di ricerca in partenariato
Partecipazione a progetti internazionali di ricerca in partenariato
Attività rivolte ai ricercatori
Partecipazione a progetti nazionali di ricerca in partenariato
Partecipazione a progetti internazionali di ricerca in partenariato
Servizi del Laboratorio
Allestimento di colture cellulari
Servizio offerto all'esterno con tariffario: NO
Colture di linfociti a breve termine, blocco delle cellule in metafase, shock ipotonico e fissazione dei preparati cromosomici.
Strumenti utilizzati: Cappa a flusso laminare; termostato refrigerato; centrifuga; cappa chimica
Analisi citogenetiche classiche
Servizio offerto all'esterno con tariffario: NO
Analisi citogenetiche classiche tra cui: allestimento di vetrini dai preparati cromosomici; colorazione di Wright; bandeggi cromosomici di tipo C, di replicazione, in fluorescenza, con endonucleasi di restrizione, impregnazione argentica; ricerca delle piastre metafasiche; acquisizione immagini al computer e allestimento di cariogrammi.
Strumenti utilizzati: Cappa chimica; centrifuga; microscopio in campo chiaro e contrasto di fase; fotocamera; software di analisi di immagine
Analisi citogenetiche molecolari
Servizio offerto all'esterno con tariffario: NO
Ibridazione in situ in fluorescenza: preparazione sonde marcate di specifiche frazioni di DNA, ibridazione sui cromosomi metafasici, rilevamento della marcatura in fluorescenza. Osservazione dei segnali d'ibridazione, acquisizione immagini in fluorescenza e allestimento cariogrammi.
Strumenti utilizzati: Termociclatore; termostato; microscopio a fluorescenza, fotocamera; software di analisi di immagine
Strumenti del Laboratorio
Microscopio a fluorescenza Zeiss Imager M1
Microscopio a fluorescenza dotato di fotocamera digitale Hamamatzu C8484 e lampade a fluorescenza HBO-100. Lo strumento è anche equipaggiato con un software per analisi di cariotipizzazione e fluorescenza (TESI Imaging, Cromodigit).
NOTA: Il costo del microscopio è 70.000€, mentre il software è costato 50.000€.
Microscopio ottico Zeiss Axioplan 2 Imaging
Microscopio ottico in campo chiaro e contrasto di fase, equipaggiato con camera Hamamatzu C4742-95.
Microscopio ottico Zeiss Axiophot
Microscopio ottico in campo chiaro e in contrasto di fase, equipaggiato con camera Sony CCD-IRIS e fluorescenza.
Note
Il laboratorio fa parte del Centro di Competenza sulla Biodiversità Marina Com.Bio.Ma.
Modalità di accesso
Il laboratorio è disponibile su prenotazione.
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Dove si trova
Cagliari, Ponte Vittorio, Via T. Fiorelli 1